無菌室的建造規程
1. 無菌(jun1)室應設有無菌操(cāo)作(zuò)間和(hé)緩衝間(jiān),無菌操作間潔淨度(dù)應達到10000級,室內溫度保持在20-24℃,濕度保(bǎo)持在45-60%。超淨台潔淨度應達到100級。
2. 無菌室應(yīng)保持清(qīng)潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防汙染。
3. 嚴防一切滅菌器材和培(péi)養(yǎng)基汙染,已汙染者應停止使用(yòng)。
4. 無菌(jun1)室應(yīng)備有(yǒu)工作(zuò)濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液(yè),等等。
5. 無菌室應定期(qī)用(yòng)適宜的消毒液滅菌(jun1)清潔,以保證(zhèng)無菌室的潔淨度符合(hé)要求。
6. 需要帶入無菌(jun1)室使用的儀器(qì),器械,平皿等一切物品,均應包紮(zhā)嚴密(mì),並應經過適宜的方法滅菌。
7. 工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒(dú)液洗手消毒(dú),然後在緩衝間更換專用工作服,鞋(xié),帽子,口罩和手套(或用70%的乙(yǐ)醇再次擦拭雙手),方可進入無菌室(shì)進行操作。
8. 無菌室使(shǐ)用前必須打(dǎ)開無菌室的紫外燈(dēng)輻照滅菌30分鍾以上,並且同(tóng)時打開超淨台進行吹風(fēng)。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。
9. 供試品在檢查(chá)前,應保持外包裝(zhuāng)完整,不(bú)得開啟,以防汙染。檢查前,用(yòng)70%的酒精棉球消毒外(wài)表麵。
10. 每次操(cāo)作過(guò)程中,均應做(zuò)陰性對照,以檢查(chá)無菌操作的可靠性。
11. 吸取菌液時,必(bì)須用吸耳球吸取(qǔ),切勿直接用(yòng)口接觸吸管。
12. 接種針每次使用前後,必須通過火(huǒ)焰灼(zhuó)燒滅菌,待冷卻後,方可接(jiē)種培(péi)養物。
13. 帶有菌液的吸管,試管,培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的(de)消毒桶內消毒,24小時後取出衝洗。
14. 如有菌液灑(sǎ)在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被汙染處至(zhì)少30分鍾,再做處(chù)理。工作衣帽等受到菌液汙染時,應立即脫(tuō)去,高壓蒸汽滅菌後洗滌。
15. 凡帶有活菌的物品,必須經消毒後,才能在水龍頭下衝洗,嚴禁汙染(rǎn)下水道。
16. 無菌室應每月檢(jiǎn)查菌落數。在超淨(jìng)工作台開啟的(de)狀態下,取內徑90mm的無菌(jun1)培(péi)養皿若幹,無(wú)菌操作分別注入融化並冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養基約15ml,放至凝(níng)固後(hòu),倒置於30~35℃培養箱培養48小(xiǎo)時,證明無菌後,取平板3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鍾後,倒置於30~35℃培養箱培養48小時,取出檢查。100級潔淨區平(píng)板雜菌數平均不得(dé)超過1個菌落,10000級潔淨室平均不得超過3個菌落。如超過限度,應對無菌室進(jìn)行徹(chè)底消毒,直至重複檢查合乎要求為止。