無菌室的建造規(guī)程(chéng)
1. 無菌室(shì)應設有無菌操作間和(hé)緩衝間(jiān),無菌操作間潔淨度應達到10000級,室內溫度保(bǎo)持(chí)在20-24℃,濕度保(bǎo)持在45-60%。超淨台潔淨度應達到100級。
2. 無菌室應保持清潔(jié),嚴禁堆放雜物,以防汙染。
3. 嚴防一切滅菌器材和培養基汙染,已汙染者應停止使用。
4. 無菌室應備有工(gōng)作濃度的消毒液,如5%的(de)甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新(xīn)潔爾滅溶液,等等。
5. 無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以(yǐ)保(bǎo)證無菌室的潔淨度符合要(yào)求。
6. 需要帶入無菌室使用的儀(yí)器,器械,平皿等一切物品,均應包紮(zhā)嚴密,並應經過適(shì)宜的方法滅菌。
7. 工作人員進入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然後在緩衝間(jiān)更(gèng)換專用工作(zuò)服,鞋,帽子(zǐ),口罩和手套(或用70%的乙醇再(zài)次擦拭雙手),方可進入無菌室進行(háng)操作。
8. 無菌室使用前(qián)必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鍾以上(shàng),並且同(tóng)時打開(kāi)超(chāo)淨台進行吹風。操作完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。
9. 供試品在(zài)檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防汙染。檢查前,用70%的酒精(jīng)棉球消毒外表麵。
10. 每次操作過程中,均應做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。
11. 吸(xī)取(qǔ)菌液時,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。
12. 接種針每次使(shǐ)用前後,必須通過火焰灼燒(shāo)滅菌,待(dài)冷卻後(hòu),方可接種培養物。
13. 帶有菌液的吸管,試管(guǎn),培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶(róng)液的消毒桶內消(xiāo)毒,24小時後取出衝洗。
14. 如有菌(jun1)液灑在桌上(shàng)或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾(ěr)傾覆在被汙染處至少30分鍾,再做處理。工作衣帽(mào)等受到菌液汙染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌後(hòu)洗滌。
15. 凡帶有活菌的物品,必須經消(xiāo)毒後,才能在水龍頭下(xià)衝洗,嚴禁汙染下(xià)水道。
16. 無菌室應(yīng)每月檢查(chá)菌(jun1)落數。在超淨工作台開啟的狀態(tài)下,取內徑90mm的無菌培養皿若幹,無(wú)菌操作分別注入融化並冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ml,放至凝固後,倒置於30~35℃培養箱(xiāng)培養48小時,證明無菌後,取平板(bǎn)3~5個,分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鍾後,倒置於30~35℃培(péi)養箱培(péi)養48小時,取出檢查。100級潔淨(jìng)區平板雜菌數平均(jun1)不得(dé)超過1個菌落,10000級潔淨室平均不得(dé)超過3個菌落。如超過(guò)限(xiàn)度,應對無菌室進行徹底消毒,直(zhí)至重複檢查合乎要求為止。