組織培養前實驗室設計
在進行植物組織(zhī)培養工作之前,首先應對工作中需要哪(nǎ)些最基本的設備條件有個(gè)全麵的了解,以便因地製宜地利用現有房屋,或新建、改建實驗室。實驗(yàn)室的大小取決於工作的目(mù)的和規模。以工廠化生產為目的,實驗室規模太小,則會限製生產,影響效率。在設計組織培(péi)養實驗室時,應按組織培養程序來沒計,避免某些環節倒排,引起日後工作混亂(luàn)。植物組織培養是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件,需要一定的設備、器材和(hé)用具,同時還需要(yào)人工控製溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。
實驗室設計原則:保(bǎo)證無菌操作,達(dá)到工作方便(biàn),防止汙染(rǎn)。
實驗(yàn)室組成:化學實(shí)驗室、洗滌菌室、無菌操作室(接種室)、培養室(shì)、細胞學實驗室、其他小型儀器設(shè)備(bèi)。
1) 化學實驗室(準備室):完成所使用的各(gè)種藥品的貯(zhù)備、稱(chēng)量、溶解、配製、培(péi)養基分裝等。
主要設備:藥品櫃、防塵櫥(放置培養容器)、冰(bīng)箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用(yòng)的培養基配製用玻璃儀器(qì).
2) 洗滌、滅(miè)菌室(shì):完成各種器具的洗滌、幹燥、保存(cún)、培養(yǎng)基的滅菌等。
主要設備:水池、操作台、高壓滅菌鍋、幹燥滅菌器(如烘箱)等。
3) 無菌操作室(接(jiē)種室):主要用於(yú)植物材料的消毒(dú)、接種、培養物的轉移(yí)、試(shì)管苗的繼代、原生質體的製備以及(jí)一切需要進行無菌(jun1)操作的技術程序。
主要設備:紫外光源、超淨工作台(tái)、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針)等。
接(jiē)種室宜小不宜(yí)大,一般(bān)7~8平米,要求地麵、天花板(bǎn)及四壁盡可(kě)能密閉光滑,易於清潔和消毒。配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動(dòng)。接種室要求幹爽安靜,清潔明亮。在適當位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一(yī)小型空調,使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與(yǔ)外界空(kōng)氣對流。接種室應設有緩衝問,麵積1m2為宜。進入無菌操作室前(qián)在此更衣換鞋,以減少進出(chū)時帶入接種室雜菌。緩衝間最好也(yě)安一盞紫外線(xiàn)滅菌燈,用以照射滅菌。
4) 培養室:培養(yǎng)室是將接種的(de)材料(liào)進行培養生長的場所(suǒ)。培養室的大小可根(gēn)據需要培養架的大小、數目、及其他附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。高度比培養架略高為宜,周圍牆壁要求有絕(jué)熱(rè)防火的性能。
培養材料放在培養架上培養。培養架(jià)大多由金屬製成,一般設5層,最低一層離地高約lOcm,其(qí)他每層間隔(gé)30cm左右,培養架即(jí)高1.7m左右。培養架長度都是(shì)根據日光燈的長度而設計,如采用40W日光燈,則長1.3m,30W的長lm,寬度一般為60cm。
培養室最重要的因子是溫度,一般保持(chí)在20—27℃左右,具備產熱裝置,並安裝窗式或立式空調機。由於熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,最好不同種類有不(bú)同的培養室(shì)。
室內濕度也要求恒(héng)定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器。控製光照時間可安裝定時開關鍾(zhōng),一般需要每天光照10-16h,也有的需要連續照明。短(duǎn)日照植物需要短日照條(tiáo)件,長日照植物需要長日照條件。現(xiàn)代組培實(shí)驗室大多設計為采用天然太(tài)陽光照作為主(zhǔ)要能源,這樣不但可以節省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可(kě)用燈光作補充。
主要設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、培養箱、紫外光源等。
5) 細(xì)胞學實驗室:用於對(duì)培養物的觀察分析(xī)與培(péi)養物的計數等。主要設備:雙筒實體顯微(wēi)鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。
6) 其他小型儀器設備(bèi):分注器、血球計數器、移液槍、過濾滅菌器、電爐等加(jiā)熱器具、磁力攪拌器、低速台式離心機等。