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實驗室(shì)培養基製備要求

2021-02-10 11:03:07

  培養基製備的(de)質量將直接影響微生物(wù)生長。因為各種(zhǒng)微生物對其營養要求不完全相同,培(péi)養目的的不同,各種培養基製備要求如(rú)下:

  1.根據培養基配方的成分按(àn)量稱取,然後溶於蒸餾水中(zhōng),在使用前(qián)對應用的試劑藥品應進行質量檢驗。

  2.PH測定及調節:PH測定要在培養基冷至室溫時進行,因在熱或冷的情(qíng)況(kuàng)下,其PH有(yǒu)一定差異,當測定(dìng)好時,按計算(suàn)量加入堿或酸混(hún)勻後,應再測試一次(cì)。培養基PH值一定要準確,否則會影(yǐng)響微生(shēng)物的生長或(huò)影(yǐng)響結果的觀察。但需注意因高壓滅菌可影響一些培養基的PH降低或升高,故不宜(yí)滅菌壓力過高或次數太多,以免影響培養基的質量,指示劑、去氧(yǎng)膽酸鈉、瓊脂(zhī)等一般在調完PH後再加入。

  3.培養基需保持澄清,便於觀察細菌的生長情況,培(péi)養基加熱煮沸後,可用(yòng)脫脂棉花或絨布過濾(lǜ),以除去沉(chén)澱物,必要時可用雞蛋白澄清處(chù)理,所用瓊脂條要預先洗淨晾幹後(hòu)使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明(míng)度。

  4.盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗淨(jìng)的中性(xìng)硬質玻璃容器(qì)為(wéi)好。

  5.培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意(yì)不因加(jiā)熱而降低其營養價值,一般121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基(jī)如(rú)糖類、血清、明(míng)膠等,則(zé)應采用低溫滅菌或間歇法滅菌(jun1),一些不能加熱(rè)的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、抗菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌後涼至(zhì)50℃左右(yòu)再加入。

  6.每批(pī)培養基製備好後,應做無菌生長試驗及所檢菌株生長試驗。如果是生化培養基,使用(yòng)標準菌株接種培養,觀察生化反應結果,應呈正常反應,培養基不應貯(zhù)存過久,必要時可置4℃冰箱存放。

  7.目前各種幹燥培養基較多,每批需用標準菌株進行生長試驗或生化反應觀察(chá),各種培養基用相應菌株生長試驗良好後方可應用,新購進的或存放過久的幹燥培養基,在配製時也應測PH,使用時需根據產品說明書用量和方(fāng)法進(jìn)行。

  8.每批製備的培養基所用化學試劑、滅菌情況及菌株生長試驗結果、製作人員等應做好記錄,以備查詢。

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